学 时:45学时
学 分:2.5学分
实验个数:12
课程性质:必修
适用专业:生物技术等本科专业
大纲执笔人:刘学春
大纲审定人:郑成超
一、实验课的性质与任务
《组织培养综合实验》是依据《细胞生物学》和《组织培养》两门专业骨干课程而设置的综合性设计性实验教学课程,为生物技术等本科专业学生必修的专业课程。通过实验教学,使学生系统掌握细胞生物学与组织培养学方面的基本实验内容的原理和操作技术,以加深对理论知识的理解,使学生系统掌握相关仪器设备的日常操作技术和维护技术,掌握如玻璃仪器的洗染等实验室常规操作技术。
二、实验目的与要求
通过基本操作类实验教学,使学生全面掌握细胞生物学与组织培养方面的常规实验操作技术,培养学生吃苦耐劳、精益求精的务实工作作风,锻炼和提高基本动手能力,要求每一个学生都应认真对待,在完成一定量的工作任务的基础,提高其基础实验操作能力。
通过综合型设计型实验的教学,使学生将以前学过的理论知识和基本实验能力加以综合运用,进行有效的有机组合,协同解决实验中出现的问题,并在此基础上,让学生在教师的指导下,自主参与实验设计,并独立地完成实验,以此培养学生的综合实验能力、实验设计能力和创新能力。要求学生在完成基础性实验的基础上,在教师的指导下独立或组成实验小组共同完成,并在实验项目完成后要写出总结。
三、实验项目及内容提要
组织培养综合实验(课程代码:BB035025) |
序号 | 实验名称 | 学时 | 必开 | 选开 | 实 验 类 型 | 内容提要 |
验 证 | 基本 操作 | 综 合 | 设 计 |
1 | 三叶草叶肉细胞叶绿体的提取与观察 | 3 | √ | | | | √ | √ | 三叶草肉细胞叶绿体的提取,光镜的使用与观察。 |
2 | 三叶草叶肉细胞原生质体的制备与观察 | 3 | √ | | | | √ | √ | 三叶草肉细胞原生质体的制备,光镜的使用与观察。 |
3 | 大蒜生长点的剥离与接种培养 | 3 | √ | | | | √ | √ | 超静工作台的使用,大蒜生长点的剥离与接种操作。 |
4 | 烟草叶片组织培养准备实验 | 6 | √ | | | √ | | | 烟草育苗及栽培管理,玻璃仪器等的清洗。 |
5 | 母液及其他药品的制备 | 3 | √ | | | √ | | | 母液及其他药品的制备 |
6 | MS培养基的制备 | 6 | √ | | | | √ | √ | MS培养基的制备。 |
7 | 高压蒸汽灭菌实验 | 3 | √ | | | √ | | | 高压蒸汽灭菌锅使用技术。 |
8 | 烟草叶片外植体无菌接种技术 | 3 | √ | | | √ | | | 取材、消毒处理、获取外植体、无菌接种操作技术。 |
9 | 愈伤组织诱导培养技术 | 6 | √ | | | | √ | √ | 愈伤组织诱导培养技术,观察外植体愈伤发生情况。 |
10 | 芽的诱导培养技术 | 6 | √ | | | | √ | √ | 芽的诱导培养技术,观察记录芽的发生情况。 |
11 | 根的诱导培养技术 | 6 | √ | | | | √ | √ | 根的诱导培养技术观察记录根的发生情况。 |
12 | 组织苗的移栽技术 | 6 | √ | | | | √ | √ | 组织苗移栽与管理技术,观察记录组培苗的生长情况。 |
13 | 植物细胞悬浮培养技术 | 18 | | √ | | | √ | √ | 植物细胞悬浮培养操作技术,恒温摇床操作技术。 |
14 | 植物原生质体培养技术 | 18 | | √ | | | √ | √ | 植物原生质体培养技术,诱导再生完整细胞壁。 |
15 | 植物体细胞杂交技术 | 18 | | √ | | | √ | √ | 植物体细胞杂交技术,重组子的筛选技术。 |
16 | 植物茎尖培养脱毒与快繁技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物茎尖培养脱毒操作,脱毒苗快繁,病毒的检测。 |
17 | 植物种质材料超低温保存技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物种质材料超低温保存技术,相关仪器操作技术。 |
18 | 植物花药浴花粉培养技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物花药浴花粉培养技术 |
19 | 植物离体授粉技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物离体授粉的操作技术 |
四、实验报告的格式
实验名称
姓名 学号 成绩
(一)实验目的
(二)实验材料、药品及仪器
(三)实验操作
(四)实验注意事项
五、课程考核方式、方法及实验成绩评定方法
课程成绩有闭卷考试成绩(50%)和实验成绩(50%)两部分组成。实验成绩着重考核学生的实验纪律与态度(25%)、实验技能(25%)、实验结果(25%)、实验报告的质量(25%)四个方面。
六、实验应配套的主要仪器设备
仪器设备名称 | 应配置的数量 |
漩涡混合仪(WH—2) | 18 |
漩涡混合仪(WH—3) | 18 |
恒温光照培养箱 | 8 |
全温振荡培养箱 | 8 |
磁力搅拌器 | 12 |
pH计 | 6 |
冰箱 | 8 |
超低温冰箱 | 2 |
生化培养箱(HPS-160) | 6 |
万分之一天平 | 6 |
百分之一天平 | 6 |
普通离心机 | 12 |
倒置显微镜 | 6 |
超净工作台 | 12 |
光学显微镜 | 36 |
实体解剖镜 | 36 |
移液枪 | 12套 |
电动玻璃匀浆机 | 12 |
药品冷藏保存箱 | 6 |
超声波清洗器 | 6 |
细胞融合仪 | 18 |
微波炉(海尔) | 6 |
高压灭菌锅 | 12 |
实验室超纯水系统 | 1 |
电子天平(FA2004A)200g/0.1mg | 6 |
电子天平(FA2004A)500g/0.1mg | 6 |
磁力搅拌器(JBC-2) | 12 |
附:教学参考书目
1.《细胞与组织培养学》,刘学春等主编,2002年
2.《细胞培养工程》,陈因良等,华东化工学院出版社,1992
3.《植物细胞工程实验技术》,孙敬之等,科学出版社,1995
4.《农作物组织培养》,颜昌敬主编,上海科学技术出版社,1991
5.《高等植物组织离体培养的形态建成及其调控》,黄学林等,科学出版社,1995
6.《植物组织培养》,王蒂等,中国农业出版社,2004